多通道多肽合成儀在運(yùn)行過程中,合成純度下降和流速異常是較常見的兩類故障,直接影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性和重復(fù)性。合成純度下降通常表現(xiàn)為目標(biāo)肽的產(chǎn)率降低、副產(chǎn)物增多或雜質(zhì)峰增多,而流速異常則表現(xiàn)為流速不穩(wěn)定、流速過慢或全部停止。 合成純度下降的主要原因包括氨基酸原料質(zhì)量不佳、活化試劑失效、偶聯(lián)反應(yīng)不充分、洗滌步驟不全以及脫保護(hù)不全等。氨基酸原料若儲(chǔ)存不當(dāng)或過期,會(huì)導(dǎo)致偶聯(lián)效率降低;活化試劑如HBTU、HOBt等對(duì)濕氣敏感,吸潮后活性下降;偶聯(lián)反應(yīng)時(shí)間不足或溫度不當(dāng),會(huì)使部分位點(diǎn)未反應(yīng);洗滌步驟不充分會(huì)導(dǎo)致未反應(yīng)試劑殘留;脫保護(hù)不全則會(huì)產(chǎn)生缺失序列肽。解決方法包括:使用新鮮的高純度氨基酸原料,嚴(yán)格密封保存活化試劑,優(yōu)化偶聯(lián)反應(yīng)時(shí)間和溫度,增加洗滌次數(shù)和體積,檢查脫保護(hù)試劑的濃度和反應(yīng)時(shí)間。
流速異常通常由管路堵塞、泵頭磨損、閥門故障或軟件設(shè)置錯(cuò)誤引起。管路堵塞多因反應(yīng)液中的固體顆粒或結(jié)晶物沉積造成,特別是使用高濃度試劑時(shí);泵頭長(zhǎng)期使用后密封圈磨損會(huì)導(dǎo)致內(nèi)漏,流速降低;電磁閥卡滯或損壞會(huì)造成流量波動(dòng);軟件參數(shù)設(shè)置不當(dāng)如流速設(shè)定過高或過低也會(huì)影響實(shí)際流量。排查方法包括:檢查管路是否有堵塞或折彎,清洗或更換堵塞管路;檢查泵頭密封圈是否磨損,必要時(shí)更換;測(cè)試電磁閥動(dòng)作是否正常,清洗或更換故障閥門;核對(duì)軟件參數(shù)設(shè)置,恢復(fù)出廠設(shè)置后重新校準(zhǔn)。

預(yù)防性維護(hù)是減少故障的關(guān)鍵。建議定期更換易損件如泵頭密封圈、管路和閥門,建立標(biāo)準(zhǔn)操作流程,記錄每次實(shí)驗(yàn)的合成條件和結(jié)果,便于追溯分析。當(dāng)出現(xiàn)故障時(shí),應(yīng)系統(tǒng)性地從原料、試劑、儀器狀態(tài)和操作條件四個(gè)方面逐一排查,避免盲目更換部件。